Grapes vinifera : Vitis Vitis Vitis vinifera Vitis: non non- - - PDF document
22/07/54 Oral Presentation CRDC 5 Grapes vinifera : Vitis Vitis Vitis vinifera Vitis: non non- -climacteric climacteric fruit fruit botanically a true botanically a true berry berry woody climbing vine woody climbing vine
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 1
Vitis: : Vitis Vitis vinifera vinifera
non-
climacteric fruit fruit
botanically a true berry berry
woody climbing vine
grows in warm, summer, warm, summer, cold cold
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 2
Nutritional value of Grapes 100 g
Nutritional value Content (mg.)
Carbohydrates 18100
Nutritional value Content (mg.)
Vitamin C 10.8 Vitamin K 0.022
Vitamin Carbohydrate Carbohydrate Vitamin C Vitamin C
glucose> fructose
Fat 160 Protein 720 Thiamine (Vitamin B1) 0.069 Rib fl i (Vit i B2) 0 07 Vitamin K 0.022 Calcium 10 Iron 0.36 Magnesium 7 Manganese 0.071
Vitamin B K Minerals anthocyanin Protein Protein
Riboflavin (VitaminB2) 0.07 Niacin (VitaminB3) 0.188 Pantothenic acid (VitaminB5) 0.05 Vitamin B6 0.086 Folate(VitaminB9) 0.002 Phosphorus 20 Potassium 191 Sodium 3.02 Zinc 0.07
Phenolic compound
resveratrol
A phytochemical is a natural bioactive compound found in plant foods that works with nutrients and dietary
found in plant foods that works with nutrients and dietary fiber to protect against diseases.
color Smell
Other : phytosynthesis,
Flavor Antioxidant Enzyme activation Self defensive
Other : phytosynthesis, respiration, growth and development
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 3
Primary metabolite Secondary metabolite
Essential Oil Resins and Balsums Alkaloids Carbohydrate Lipids P i Glycosides
Phenolic compounds
Proteins Phenolic compounds are naturally occurring secondary
Phenolic compounds
> 8000 type
Phenolic compounds are secondary metabolites that are derivatives of the pentose phophate, shikimate, and phenylpropanoid pathways in plant. phytochemicals. The term ‘phenolic’ is used to define substances that possess one or more hydroxy (OH) substituents bonded
Marinova et al.,2005, Balasundram et al.,2006
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 4
photosynthesis
7 groups of phenolic compounds
1. Flavonoids (polyphenols): anthocyanins, isoflavones,catechins, Quercetin Quercetin, , myricetin myricetin, , apigenin apigenin, , lueteolin
lueteolin, , kaempferol
kaempferol, isorhamnetin isorhamnetin
anthocyanins
Isoflavones (ถัวเหลือง) catechins Quercetin Quercetin myricetin myricetin apigenin apigenin lueteolin lueteolin kaempferol kaempferol
rutin rutin
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 5
neochlorogenic neochlorogenic acid acid, p-coumaric coumaric acid acid
gallic acid (มะม่วง ชา ) Vanillin (วะนิลา) tannic acids (ชา เบอร์รี) p‐coumaric acid coumaric acid neochlorogenic acid neochlorogenic acid
chlorogenic acid
caffeic acid (แอปเปิล) ferulic acid(ส้ม สับปะรด) chlorogenic acid (กาแฟ สตรอเบอรี)
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 6
4. . Lignans Lignans: : pinoresinol pinoresinol
pinoresinol (เมล็ดงา)
. Tannins: condensed tannins (ชา) 6 Q i Q i b h b h th th
Flavone Gallic acid
. Quinones, benzophenones benzophenones : : xanthones xanthones (
(มังคุด)
. Others: monophenol monophenol, , tyrosol tyrosol ester, ester, stilbenoids stilbenoids, , punicalagins punicalagins
stilbenoids stilbenoids
resveratrol glucopyranoside
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 7
anthocyanins quercetin rutin ll i id catechin epicatechin myricetin
ellagic acid resveratrol kaempferol resveratrol Catechin is a polyphenolic antioxidant plant secondary metabolite. The term catechins is also commonly
secondary metabolite. The term catechins is also commonly used to refer to the related family of flavonoids and the subgroup flavan-3-ols (or simply flavanols).
http://en.wikipedia.org/wiki/Catechin#Chemistry (+)-catechin (-)-catechin
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 8
Epicatechin is a polyphenolic antioxidant plant secondary metabolite.
Epicatechin can be found in cacao beans. The different other enantiomers can as well be found in chocolate.
http://en.wikipedia.org/wiki/Catechin#Chemistry
(-)-epicatechin
(+)-epicatechin
Variety/clone Phenolic content (mg/100 g DM) Seeds
Catechin Epicatechin AP SG1 96.9+5.9 d 106.8+1.6 d
Related research
F 9 74.4+0.9 e 98.4+9.9 de ISV 2 72.9+7.0 e 88.0+0.7 e ISV RC1 60.3+8.3 e 67.9+6.2 f Merlot 138.8+0.4 bc 131.8+9.7 c Cabernet Sauv. 141.8+7.9 b 127.6+4.4 c Canaiolo 140.7+2.2 bc 205.7+3.1 a Colorino V.no 124.4+0.1 c 89.0+8.6 e Foglia Tonda 67.4+5.1 e 47.2+3.5 g Montepulciano 205.7+19.0 a 164.6+16.8 b
Iacopini และคณะ, 2008
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 9
years Sample Variables Influence on Alonso et al. 1991 Entire dried seeds from red grape marc after vinification Water content in ethanol: 5–40–60–80% Extraction time (without stirring): 3–6–12 h Yield of catechins and proanthocyanidins Entire dried seeds from Related research Pekic et al. 1998 white grape marc after pressing Water content in ethyl acetate: 3.3–5–10– 15–20% Extraction time 1–12–24 h Yield of proanthocyanidins Manzano et al. 2004 grape seed and skin 80% ethanol Extraction time 1-5 h Yield of flavan-3-ols Pinelo et Dried red and white Solvent: ethanol, methanol, water Solvent/solid ratio: 1–3–5 (v/w) Extraction time: 30–60–90 min Extraction Yield of total phenols, concentration andantioxidant al 2005grape marc temperature: 25–37.5–50 ˚C activity of extract Iacopini et al. 2008grape seed and skin ethanol:water:hydrochloric acid 0.12M(70:29:1 v/v/v) f: 4 h Yield of catechins and epicatechin
several plants when under attack by pathogens such as bacteria or fungi.
constituent of red wine
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 10
B A
Content of Resveratrol and Piceid Isomers in Grape Berry Skins Extracted in Ethanol 80% at 60 °C during 30 min
Romero‐Perez, 2001
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 11
years Sample Variables Influence on Romero- Perez et l 2001 grape berries selected were from the Carinena d i t five extraction solvents were tested: ethanol/water(80:20 v/v), ethanol 100%, ethyl acetate/methanol (50:50 v/v),acetone/water (75:25 / ) d t 100% t 60 °C f 30 i Resveratrol and Piceid Isomers in G B Ski
Related research
al. 2001red variety v/v), and acetone 100%. at 60 °C for 30 min Grape Berry Skins Pineiro et al. 2006 grapes of the Viura (white) and Tempranillo (red)varieties cultivated in Jerez (Spain) Solvent: methanol different temperatures 50, 100, 150 ˚C Determination of trans-resveratrol in grapes Spigno and De Dried powdered red grape marc (after Solvent: 90% ethylacetate–ethanol Faveri Extraction time: 5–24 hExtraction temperature: 28– Yield of total phenols, resveratrol and antioxidant Faveri 2007 g p ( vinification) and stems p 60 ˚C activity of extract Iacopini et al. 2008grape seed and skin ethanol:water:hydrochloric acid 0.12M(70:29:1 v/v/v) f: 4 h Yield of resveratrol
Marti และ คณะ 2001 สกัด resveratrol จาก grape skin (Vitis vinifera) Final extraction conditions were:40°C, 150 bar, 7.5% ethanol and extraction time 15 min. ั
Related research
Piantino และคณะ 2008 สกัด phenolic จากBaccharis dracunculifolia temperatures of 40, 50 and 60 ◦C and pressures
Gelmez และคณะ 2009 สกัด phenolic จาก roasted wheat germ pressure (148–602 bar), temperature (40–60 ◦C) and time (10–60 min) Benova และคณะ 2010 สกัด resveratrol จาก Japanese knotweed pressure 25–40 Mpa , temperature 50–110 ◦C and extraction time 5–60 min Casas และ คณะ 2010 สกัด resveratrol จาก Palomino fino grapes pressure 100, 400 bar, temperature 35, 55 ◦C addition of modifier (5% v/v of ethanol) Castro‐ Vargas และคณะ 2010 สกัด phenolic จาก guava seeds (Psidium guajava L.) co‐solvents:ethyl acetate (EtAc)and ethanol (EtOH) conditions, using 10, 20 and 30MPa and 40,50 and 60 ◦C.
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 12
งานวิจัยทีเกียวข้องกับการศึกษาคุณสมบัติของ resveratrol
ศึกษาผลของ resveratrol ในการยับยังเนือ Li และคณะ 2007 ศกษาผลของ resveratrol ในการยบยงเนอ งอก และ Leukemia cell L 1210 Colin และคณะ 2008 ศึกษาคุณสมบัติผลของ resveratrol ในการ ยับยังเซลล์มะเร็ง Fukui และคณะ 2010 ศึกษาคุณสมบัติผลของ resveratrol ในการ ยับยังเซลล์มะเร็ง Leiro และคณะ 2010 ศึกษาผลของ resveratrol ในการยับยังเนือ งอก
องุ่นป ๊ อกดํา ไวน์
ทิง
บ่ม คันแยกนําและกาก peel seed
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 13
ประสิทธิภาพการต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดเมล็ดและเปลือก องุ่นพันธุ์ป ๊ อกดํา
การเตรียมตัวอย่างและการสกัด
40°C แยกเปลือกและเมล็ด
องุ่นป ๊ อกดํา บด
40°C แยกเปลือกและเมล็ด
องุ่นป ๊ อกดํา
ร่อนด้วย mesh ขนาด 60
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 14
วิเคราะห์ปริมาณฟีนอลิกทังหมดโดยใช้ Folin Ciocalteu method
10% folin‐ciocalteu phenol reagent 5 mL 7.5% sodium carbornate 4 mL
ตัวอย่าง 50 μL + นํากลัน 0.95 mL
Spectrophotometer
Singleton and Rossi, 1965 2 hr 30 min
760 nm
เทียบผลกับกราฟของสารละลายมาตรฐาน gallic acid
High‐performance liquid chromatography (HPLC)
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 15
การวิเคราะห์สาร resveratrol, catechin และ epicatechin
resveratrol catechin และ epicatechin
mobile phase A คือ glacial acetic acid in water 52.6:900 (v/v) และ mobile phase B คือ 20%phase A และ 80%acetonitile (ACN) โดย อัตราส่วนของ A:B คือ 0 min, 83.5% A, 16.5% B; 13 min, 82.0% A, 18.0% B; 15 min, 82.0% A, 18.0 B; 17 min 77.0% A, 23.0% B flow rate 0.5 ml/min นาน 50 นาที ใช้ตัวอย่างปริมาณ
mobile phase B คือ 0.05% PPA อัตราส่วน A:B คือ 13%:87% flow rate 0.5 ml/min ใช้ ตัวอย่างปริมาณ 20 μl ใช้ UV-visible diode- array ความยาวคลืน 231 nm วิเคราะห์ ปริมาณเทียบกับกราฟมาตรฐาน catechin, 100 μl ใช้ UV-visible diode-array ความยาวคลืน 306 nm วิเคราะห์ปริมาณเทียบกับกราฟ มาตรฐานเรสเวอราทรอล ฐ epicatechin
วิเคราะห์ประสิทธิภาพการเป็นสารต้านอนุมูลอิสระด้วยวิธี DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)
ตัวอย่าง 50 μL 0.1 mM DPPH 3.95 mL
Spectrophotometer
30 min
517 nm
เทียบผลกับกราฟของสารละลายมาตรฐาน Trolox
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 16
วิเคราะห์ประสิทธิภาพการเป็นสารต้านอนุมูลอิสระด้วยวิธี ABTS 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)
ตัวอย่าง 50 μL ABTS•+ 3.95 mL
Spectrophotometer
6 min
734 nm
เทียบผลกับกราฟของสารละลายมาตรฐาน Trolox
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 17
ปริมาณ total phenolic
120
116.4 mg GAE/g DW Seed ; 67‐87 mg GAE/g DW Peel ; 9‐14 mg GAE/g DW
20 40 60 80 100 Phenolic contents (mg GAE/g DW)
seed peel
<0.01 mg GAE/g DW
20 1hrs 30°C 1hrs 40°C 1hrs 50°C 12hrs 30°C 12hrs 40°C 12hrs 50°C 24hrs 30°C 24hrs 40°C 24hrs 50°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C
water ethanol petroleum ether
Resveratrol
seed peel
Resveratrol Resveratrol
p
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 18
ปริมาณ resveratrol
250 300
268.31μg/g DW Seed ; 243.32 μg/g DW peel; 207.95 μg/g DW
100 150 200 resveratrol contents(μg/g DW)
seed peel
50 1hrs 30°C 1hrs 40°C 1hrs 50°C 12hrs 30°C 12hrs 40°C 12hrs 50°C 24hrs 30°C 24hrs 40°C 24hrs 50°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C
water ethanol petroleum ether
catechin epicatechin
seed peel
catechin epicatechin catechin catechin epic
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 19
450 500 150 200 250 300 350 400 catechin contents (mg/100g DW)
seed peel
50 100 1hrs 30°C 1hrs 40°C 1hrs 50°C 12hrs 30°C 12hrs 40°C 12hrs 50°C 24hrs 30°C 24hrs 40°C 24hrs 50°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C
water ethanol petroleum ether
ปริมาณ epicatechin
300
250.89 mg/100gDW
100 150 200 250 picatechin contents (mg/100g DW)
seed peel
<0.01 mg /100g DW
50 1hrs 30°C 1hrs 40°C 1hrs 50°C 12hrs 30°C 12hrs 40°C 12hrs 50°C 24hrs 30°C 24hrs 40°C 24hrs 50°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C ep
water
/100g DW
ethanol petroleum ether
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 20
ประสิทธิภาพการต้านอนุมูลอิสระ (DPPH)
60
54.58 mM TE/g DW Seed ; 33‐48 mM TE/g DW Peel ; 1‐3 mM TE/g DW
20 30 40 50 mM TE/g DW seed peel
<0.01 mM TE/g DW
10 1hrs 30°C 1hrs 40°C 1hrs 50°C 12hrs 30°C 12hrs 40°C 12hrs 50°C 24hrs 30°C 24hrs 40°C 24hrs 50°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C
water ethanol petroleum ether
ประสิทธิภาพการต้านอนุมูลอิสระ(ABTS)
45.33 mM TE/g DW 37.36 mM TE/g DW
15 20 25 30 35 40 45 50 mM TE/g DW seed peel
<0.01 mM
5 10 15 1hrs 30°C 1hrs 40°C 1hrs 50°C 12hrs 30°C 12hrs 40°C 12hrs 50°C 24hrs 30°C 24hrs 40°C 24hrs 50°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C 1hrs 30°C 12hrs 30°C 24hrs 30°C
water ethanol petroleum ether
TE/g DW
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 21
1 สารสกัดจากเมล็ดขององ่นพันธ์ป ๊ อกดํามีปริมาณ 1. สารสกดจากเมลดขององุนพนธุปอกดามปรมาณ total phenolic, resveratrol, catechin, epicatechin และ ประสิทธิภาพการต้านอนุมูลอิสระสูงกว่าสารสกัดจาก เปลือก ั ้ ั โ ป็ ีไ ้
ปริมาณ resveratrol, catechin, epicatechin และมี ประสิทธิภาพการต้านอนุมูลอิสระสูงทีสุด
3 รส ั ้ ํ ิ 40°C 1 ชั โ ไ ้
ปริมาณสารฟีนอลิค resveratrol, catechin, epicatechin และประสิทธิภาพการต้านอนุมูลอิสระสูง
Oral Presentation CRDC 5 22/07/54 22
Acknowledgement :