Allogene Stammzelltransplantation bei HIV Kann der Berlin-Patient - - PowerPoint PPT Presentation

Allogene Stammzelltransplantation bei HIV – Kann der Berlin-Patient wiederholt werden?

HIV assoziiertes großzelliges anaplastisches (T-Zell-)Lymphom

im Stadium IVB nach Ann-Arbor-Klassifikation (ED 09/11)

Allogene Stammzelltransplantation

von einer HLA-kompatiblen Fremdspenderin mit homozygoter CCR5 Delta 32 Depletion und anschließendem Shift des HIV-Tropismus

AREVIR-GenaFor-Meeting Köln, 29.-30. April 2016

• St. Esser*, L. Kordelas**, R. Kaiser***, J. Verheyen****

* Klinik für Dermatologie und Venerolgie, Universitätsklinikum Essen

** Westdeutsches Tumorzentrum, Klinik für Knochenmarkstransplantation, Universitätsklinikum Essen *** Institut für Virologie, Universitätsklinikum Essen **** Institut für Virologie, Universitätsklinikum Köln

2 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

• 30 jähriger MSM: Late Presenter:

– entzieht sich nach HIV-ED wiederholt der Betreuung

• HIV-Infektion Stadium CDC WHO C3 (ED 2006)
• HIV-RNA 462.500 Kopien/ml; CD4 121 Zellen/μl

– AIDS definierende Erkrankungen

• Pneumocystis jirovecii Pneumonie
• CMV-Pneumonia
• Soorösophagitis

– Erneute ART Einleitung, OI-Therapie

• HIV-assoziiertes, großzellig-anaplastisches,T-Zell-Lymphom

rechter OS:

– Immunhisto.: CD5/CD30+, ALK-, LCR+, TCR monoklonal, HHV8- – Knochenmarkstanze: Kein Lymphomnachweis – Hepatosplenomegalie, Keine weiteren Lymphommanifestationen Inspektion Histologie

HE x 400 HE x 20

HIV-assoziiertes, großzellig-anaplastisches T-Zell-Lymphom,

Stadium IVB Ann-Arbor-Klassifikation CT scan

CT-Scan

Lokale Destruktion der glutealen Muskulatur und des Os ileum

3 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

• Inzidenz:

– Selten; m:f 4:1 – Fast 15 x häufiger bei HIV-Infizierten als in der Allgemeinbevölkerung

• Fortgeschrittene Stadien der HIV-Infektion

– (CD4 < 200µl; HIV-RNA > 200.000 Kopien/ml)

• Diagnose Lymphom erfolgt häufig erst in fortgeschrittenen Stadien:

– B-Symptomatik, erhöhte LDH – Stadium III und IV Ann-Arbor-Klassifkation, – Häufig extranodale Beteiligung

• Oft Nachweis von EBV und/oder auch HIV in Tumorzellen
• Medianes Überleben ALCL: 6 Monate

T-Zell-Lymphome und HIV: Inzidenz

Castillo et al., 2009; Castillo et al., 2010

4 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

• 4 Zyklen Chemotherapie: EPOCH Regimen

– Progress

• 3 Zyklen GMALL/B-NHL-Protocol

– Partielle Remission (Kein Anhalt für Tumormanifestation abdominell/intrathorakal/intrathekal) im CT und im MRT

• Myeloablative Konditionierungstherapie mit

– hyperfraktionierter Ganzkörperbestrahlung (12 Gy), – Fludarabin und ATG

• Allogene Transplantation mit den peripher gewonnenen

hämatopoietischen Stammzellen einer HLA-kompatiblen Fremdspenderin mit HLA-C-Antigen-Mismatch und homozygoter CCR5 Delta 32 Depletion

HIV-assoziiertes, großzellig-anaplastisches T-Zell-Lymphom,

Therapie und Verlauf

Der „Essen Patient“?

5 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Der „Berlin Patient“: Der Einzige von HIV „Geheilte“?

• Homozygosity for a 32 base pair deletion in the CCR5 allele (CCR5 delta32) prevents the cellular entry
• f R5 tropic HIV-1 strains.
• In 2009 the case of a cured HIV-1 infected patient with acute myeloid leukemia, who received

allogeneic stem cell transplantation (alloSCT) from a donor homozygous for CCR5 delta32 mutation, gave rise to hope for new eradication strategies of HIV-1 infection.

• However, up to now this case has remained unique. Furthermore in HIV-1 infected patients receiving

alloSCT from CCR5 wild-type donors viral rebounds have been reported.

6 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Synopsis of the „Essen Patient“

6

02/2006 HIV diagnosis ART started (emtricitabine, tenofovir, lopinavir/ ritonavir) Depression No medical care 10/2009 AIDS ART restarted (emtricitabine, tenofovir, lopinavir/ ritonavir)

ALK CD3 CD30 CD5

08/2011 AIDS large-cell anaplastic T-cell lymphoma, CD30+, ALK-, TCR monoclonal 10/2011 4 courses EPOCH 02/2012 A1-C1 of GMALL/B- NHL-protocol after lymphoma relapse 08/2011 ulcerating tumor right hip AlloSCT on 12.06.2012

6 weeks post AlloSCT

08/2012 lymphoma relapse on right hip -> RTx 03/2013 lymphoma relapse on right knee -> RTx 06/2013 Death due to lymphoma progression ART: antiretroviral therapy; EPOCH: etoposide, prednisone, vincristine, cyclophosphamide, doxorubicin

Overview of chemotherapy, AlloSCT, immune suppressive therapy and CD4 cell count

CD4 cell count cells/µl

Kordelas L, Verheyen J, Esser S: N Engl J Med 371;9: 880-882 Chimärismusanalyse mittels XY-Fish: 19.07.2012 100% Donorzellen 31.07.2012 Y-Chromosom spezif. DNA 0,08 ng

1 10 100 1.000 10.000 100.000 1.000.000 10.000.000

FTC,TDF,LPV/r TI FTC, TDF,LPV/r 3TC, ABC,LPV/r

3TC, ABC, RAL

TI

HIV tropism (-103d): RNA: FPR 24.7% CTRPNNNTRKGIHLGPGKVFYAT–EIIGDIRKAYC DNA: FPR 6.6% CTRPNNNTRRGIHLGPG(K/R)VFYAT-EIIGD(T/I)RQAYC HIV tropism: (+20d) RNA: FPR: 0.4% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC HIV tropism: (+280d) DNA: FPR: 0.4% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC HIV tropism: (-287d) RNA : FPR: 8.2% CTRPNNNTRKGIPLGPGKVFYAT–EIIRDIRKAYC

HIV load, tropism and ART: Shift of HIV Tropism in Stem-Cell Transplantation with CCR5 Delta32 Mutation.

AlloSCT on 12.06.2012

HIV tropism: (- 18d) DNA: FPR: 4.4% CTRPNNNTR(K/R)( A/G)IHLGPG(K/R)V FYAT- EIIGDIR(K/Q)AYC

HIV RNA Copies per ml

Kordelas L, Verheyen J, Esser S: N Engl J Med 371;9: 880-882

9 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

“Essen patient“: HIV V3 sequences before and after alloSCT

consensus B CTRPNNNTRKSIHIGPGRAFYTTGEIIGDIRQAHC

• 287 days

RNA V01-36.4% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRQAYC 10,5 V02-19.5% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRQAYC 10,5 V03-17.0% CTRPNNNTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAYC 8,5 V04-2.8% CTRPNNNTRKGITLGPGRVFFAT-EIIGDIRKAYC 6,9

• 103days

DNA V01-27.1% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRQAYC 10,5 V02-22.2% CTRPNNNTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAYC 8,5 V03-6.2% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRQAYC 10,5 V04-4.6% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRKAYC 6,8 V05-4.4% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V06-4.1% CTRPNNNTRKGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRKAYC 5,7 V07-2.5% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRKAYC 6,8 V08-0.9% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EIIGDIRQAYC 10,5 V09-0.7% CTRPNNNTRRGIHLGPGKVFYAT-EVIGDIRQAYC 7,8 V10-0.6% CTRPNNNTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRKAYC 6 V11-0.5% CTRPNNNTRKGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAYC 7 RNA V01-77.9% CTRPNNNTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAYC 8,5 V02-1.0% CTRPNNNTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAFC 6,8 V03-1.0% CTRPNNSTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAYC 4,2 V04-0.6% CTRPNNNTRRGIHLGPGRVFYAT-EIIGDIRQAYC 8,5 V05-0.5% CTRPNNNTRRGIHLGPWRVFYAT-EIIGDIRQAYC 11,7 +020 days RNA V001-77.3% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V002-1.4% CTRPNNKTRKAITLGPGRIYYTK-EIIGDIRKAYC 0,5

• V3 (env) region is amplified and

sequenced (Sanger sequencing)

• Predicted coreceptor usage:

geno2pheno(coreceptor) = false- positive rates (FPR)

• FPR <5 => X4-capable (X4-

tropic or dual-tropic)

• FPR 5-15 => intermediate
• FPR >15 => R5-tropic
• V3 (env) region is ampified

and sequenced (Illumina MiSeq

platform)

• NGS => clonal information

about the V3-sequence

• Maraviroc (Coreceptor-

Antagonist) is less likely to inhibit viral replication:

• >2% of HIV variants

have a FPR <3.5

10 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

+020 days RNA- NGS V001-77.3% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V002-1.4% CTRPNNKTRKAITLGPGRIYYTK-EIIGDIRKAYC 0,5 +373 days DNA

• NGS

V001-74.7% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V002-1.0% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V003-0.6% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIEDIRKAYC 0,7 RNA- NGS V002-80.4% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V005-0.7% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGGIRKAYC 0,4 V008-0.7% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EVIGDIRKAYC 0,2 V006-0.6% CTRPNNKTRKAIALGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,2 V007-0.5% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-ETIGDIRKAYC 0,2 V001-0.5% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V003-0.5% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKAYC 0,4 V004-0.5% CTRPNNKTRKAITLGPGRVYYTK-EIIGDIRKA*C

Essen patient: HIV V3 sequences after alloSCT

11 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

“Essen patient”: phylogenic analysis of V3 sequences

12 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

• The viral tropism of HIV-1 was determined by genotyping V3 and the bioinformatic algorithm geno2pheno[coreceptor]

indicating the probability of classifying a R5-virus falsely as X4

– (FPR<5: X4 capable; FPR 5-10: intermediate; FPR>15: R5-tropic).

• Before alloSCT the viral tropism from viral RNA was predicted as being either R5-tropic (FPR: 24.7%) or

intermediate (FPR: 8.2%) while the V3 sequence from proviral DNA was classified as intermediate (FPR: 6.6%) or X4-capable (FPR: 4.4%).

• Antiretroviral therapy (ART) was stopped with the start of the myeloablative treatment, but ART was reinitiated 3

weeks after alloSCT due to the HIV-RNA rebound of 93,390 c/ml.

• The V3 sequence was clearly related to the previous genotypes and carried several specific mutations resulting in

the prediction of an extremely X4-capable virus (FPR: 0.4%).

• The ART could effectively suppress viral replication until - due to the relapse of the T-cell lymphoma -any ART was

stopped (HIV-1 RNA 7,582,496 c/ml).

• The genotypic analyses of HIV-1 variants show a shift from a previously dominantly R5-tropic HIV prior to the

alloSCT from a donor homozygous for CCR5 delta32 mutation towards an extremely X4-capable HIV after alloSCT

The „Essen Patient“

Kordelas L, Verheyen J, Esser S: N Engl J Med 371;9: 880-882

13 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

First Allogeneic SCT for HIV patient with AML with CCR5 Delta32 mutated donor in 2007 – the „Berlin Patient“

Source: Hütter G. et al. NEJM 2009; Hütter G, Ganepola S, SWJ 2011; Hütter G, MMW 2013; Symons J, …, Hütter G et al. CID 2014 Abbrev: ART: antiretroviral therapy; PB: peripheral blood

The „Berlin Patient“ – HIV and AML

• HIV dominantly CCR5-tropic, but also 2.9% population X4-tropic
• Out of 62 donors sequenced for CCR5 one homozygous for CCR5 delta 32 deletion
• Although the patient had non–CCR5-tropic X4 variants and ART was discontinued, no HIV load or proviral

DNA could be detected in PB, gut, liver, and brain samples

• Patient showed „partial sero-deconversion“ with decreasing HIV-antibodies
• Debate: functional or sterilizing cure?

14 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

„Berlin Patient“ vs „Essen Patient“

Shift of HIV Tropism in Stem-Cell Transplantation with CCR5 Delta32 Mutation.

Kordelas L, Verheyen J, Beelen DW, Horn PA, Heinold A, Kaiser R, Trenschel R, Schadendorf D, Dittmer U, Esser S; Essen HIV AlloSCT Group: N Engl J Med 371;9: 880-882

15 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Unterschiede zwischen dem „Berlin“ und dem „Essen Patienten“

Hütter G et al. Viruses 2015

„Nachteile“ des Essener Patienten

• Aggressivere HIV-Infektion

beim Essener Pat: raschere ART-Pflichtigkeit und Malignom-Entwicklung

• Höheres Risiko für Tropismus-

Wechsel von R5 zu X4 durch zusätzliche V3-Mutationen

• ART eine Woche vor AlloSZT

pausiert: Proliferations- und Selektionsmöglichkeit für X4- Tropismuswechsel

• Spätes Engraftment Zeichen

des HIV-Effektes auf neue Hämatopoese

• Schwächeres HIV-“Purging“

im Vergleich zu zwei AlloSZT beim Berliner Pat.

• Rezidiv des T-Zelllymphoms

Haupterkenntnis vom „Essener“ Pat: ART bis zum stabilem Engraftment und 100% Donorchimärismus fortführen

16 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Übersicht: AlloSZT mit CCR5 D32-Mutation bei HIV-Patienten

Hütter G et al. NEJM 2014, Duarte RF et al. Lancet HIV 2015

Der „Essen Patient“ ist der bisher Einzige nach dem „Berlin Patient“ mit einer AlloSZT von einem homozygoten CCR5 D32-Mutation Donor, der länger als 4 Monate überlebt hat* und bei dem die ART abgesetzt wurde.

17 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

AlloSCT not an option for many HIV patients with hematological malignancies – New strategy: CCR5 mutation induced in autologous cells by Zinc finger nucleases (ZFN)

CCR5 expression in HIV-1 target cells can be completely eliminated by ZFN

• ZFN cause double-stranded DNA break
• Subsequent repair can lead to permanent

disruption of the gene’s open reading frame

• CCR5 ZFNs are being evaluated in clinical trials of ex

vivo expanded autologous T cells

Cannon P, June C, Curr Opin HIV AIDS 2011; Kiem HP et al. Cell Stem Cell 2012; Tebas et al. NEJM 2014 NHEJ: non-homologous end-joining (error-prone )

The “Essen Patient” shows, that viral escape mechanisms might hamper CCR5-knockout strategies to control HIV infection

Tebas et al. NEJM 2014

• 12 patients in an open-label, nonrandomized,

uncontrolled study of a single dose of ZFN-modified autologous CD4 T cells

• The blood level of HIV DNA decreased in most

patients

• HIV RNA became undetectable in one of four

patients who could be evaluated

Vielen Dank für ihre Aufmerksamkeit!

• HIV-Ambulanz, Hautklinik

–

• Dr. Esser, Prof. Schadendorf
• Westdeutsches Tumorzentrum, Hämatologie

– Prof., Dührsen, PD Novotny

• Westdeutsches Tumorzentrum, Klinik für

Knochenmarkstransplantation

–

• Prof. Beelen, Dr. Trenschel, Dr. Dr. Kordelas Lambros
• Strahlenklinik

–

• Prof. Stuschke, Dr. Engelhard
• Institut für Transfusionsmedizin

–

• Prof. Horn, Prof. Lindemann
• Virologie Essen/Köln

– PD Verheyen, Prof. Timm, –

• Dr. Kaiser, Dr. Lübke

19 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

HIV tropism

V3 (env) region is amplified and sequenced (Sanger sequencing) Predicted coreceptor usage: geno2pheno(coreceptor) = false-positive rates (FPR) FPR <5 => X4-capable (X4-tropic or dual-tropic) FPR 5-15 => intermediate FPR >15 => R5-tropic V3 (env) region is ampified and sequenced (Illumina MiSeq platform) NGS => clonal information about the V3-sequence Maraviroc (Coreceptor-Blocker) is less likely to inhibit viral replication >2% of HIV variants have a FPR <3.5

• X5-Viren verursachen praktisch alle sexuell

übertragenen HIV-Infektionen1,2

• Bleiben im Verlauf der HIV-Erkrankung

meistens vorherrschend

• ~50% aller Patienten mit HIV-1B, die an AIDS

versterben, haben ausschließlich R5-Viren1,3

1 Moore JP et al. AIDS Res Hum Retroviruses 2004;20(1):111-126. 2 Berger EA et al. Annu Rev Immunol 1999;17:657-700. 3 Shaheen F et al. Curr Opin Infect Dis 2004;17:7-16. 1 Brumme ZL, et al. J Infect Dis. 2005;192:466-474. 2 Moyle GJ, et al. 15th IAC 2004. Abstract WePeB5725. 3 Richman DD, et al. J Infect Dis. 1994;169(5):968-974.

CCR5-trope HIV-Viren (X5-Viren)

• Reine X4-Infektionen sind selten1,2
• X4-Viren können auch nach jahrelang

bestehender HIV-Infektion auftreten1,3

• X4-Viren sind assoziiert mit:
• niedrigeren CD4-Zellzahlen1,2,3
• rascherem Abfall der CD4-Zellzahlen3
• rascherer Krankheitsprogression3

CXCR4-5rope HIV-Viren (X4-Viren)

Chemokin-Rezeptoren beim HIV-Entry

HIV infiziert Zellen, die CD4-Ag und einen Chemokinrezeptor auf ihrer Oberfläche exprimieren!

CD4 Korezeptor

C-X-C-Chemokin-Rezeptor 4 = CXCR4; X4 Monozyten, T-Zellen, B-Zellen, Neutrophile C-C-Chemokin-Rezeptor 5 = CCR5; R5 Monozyten, T-Zellen

1 Deng H et al. Nature 1996; 381:661-6. 2 Feng Y et al. Science 1996; 272:872-7.

Entdeckung der CCR5 ∆32-Deletion

• Stark HIV-exponierte Individuen, die sich nicht infizierten,

wurden molekulargenetisch untersucht

• In beiden Kopien des CCR5-Gens wurde eine Deletion von

32 Basenpaaren entdeckt (CCR5 ∆32 Homozygotie)1,2

• CCR5-∆32 wird auf der Zelloberfläche nicht exprimiert
• ∆32-Mutationsträger haben ein normal funktionierendes Immunsystem
• Prävalenz CCR5∆32 Homozygotie: Etwa 1% der Kaukasier
• Klinisch zeigen ∆32 heterozygote HIV-Infizierte

eine langsamere Krankheitsprogression und längere Überlebenszeit

Huang Y et al. Nat Med 1996; 2:1240-3. Michael NL et al. Nat Med 1997; 3:1160-2. Eugen-Olsen J et al. AIDS 1997; 11:305-10. Liu R et al. Cell 1996; 86:367-77. Samson M et al. Nature 1996; 382:722-5. Dean M et al. Science 1996; 273:1856-62.

CCR5 Wildtyp (wt)

CCR5 ∆32 wt / wt wt / ∆32 ∆32 / ∆32

Normale Krankheits- progression Verlangsamte Krankheits- progression “Resistenz”? gegen HIV

Wildtyp-Homozygotie ∆32-Heterozygotie ∆32-Homozygotie

Nach de Roda-Husman AM et al. Ann Intern Med 1997; 127:882-90.

22 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Die allogene Stammzelltransplantation (AlloSZT) bietet für viele Leukämien eine definitive Heilungschance, ist aber kompliziert und gefährlich

22

Leukämie AlloSZT Voraussetzungen für die AlloSZT

• Möglichst höhe HLA-Übereinstimmung zwischen Patient und Spender
• Konditionierung des Pat: Chemo- oder Chemo- und Radiotherapie
• SZ-Quelle: Knochenmark oder periphere Blutstammzellen
• Frühes Risiko: Transplantations-assoziierte Mortalität (ca. 5-20%)

Gesundes BB Mögliche Komplikationen Rezidiv Infek- tionen GvHD

23 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

CT scan

HIV-assoziiertes, großzellig-anaplastisches T-Zell-Lymphom,

Stadium IVB Ann-Arbor-Klassifikation

• Knochenmarkstanze: Kein Lymphomnachweis
• CT-Scan: Lokale Destruktion der glutealen Muskulatur und des Os ileum
• Hepatosplenomegalie
• Keine weiteren Lymphommanifestationen

24 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Großzellig-anaplastisches T-Zell-Lymphom und HIV: Prognose

Castillo et al., 2009; Castillo et al., 2010

• Medianes Überleben ALCL:
• 6 Monate
• Prognostisch günstig:
• Nachweis von EBV (?)
• ART
• Prognostisch ungünstig:
• ECOG >1,
• CD4+ <200/µl

25 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

Treatment of HIV and AML by Allogeneic CCR5-d32 Blood Stem-Cell Transplantation

• The Berlin patient is presumed to be the only person cured from

HIV-infection by hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) from a homozygous CCR5-d32 unrelated donor. Attempts to reproduce cure by HSCT have failed because of either viral rebound or death due to the underlying malignancy. We here report a patient alive, well and negative for proviral DNA 900 days after allogeneic CCR5-d32 HSCT.

• A 41y old HIV-infected male patient was diagnosed acute

myeloid leukemia (AML, inv16, CBF-MYH11) in 01/2011. Since the diagnosis of HIV-infection in 10/2010 he had been treated with TDF/FTC+ DRV (01/2011 VL 44 cop/mL; CD4+ 474 cells/µl). To avoid interactions with chemotherapy DRV was switched to RAL in 03/2011. He achieved CR of the AML after 1 induction course (ICE) and received a 2nd induction and 3 consolidation courses according to AML-SG 07/04. In 09/2012 AML relapsed and he was treated with A-HAM and a 2nd cycle high-dose

• cytarabine. While in 2nd CR he received 8.74x10E6/kg

unmodified peripheral blood stem cells from a female 10/10 CCR5-d32 DKMS-donor after conditioning with fludarabine and treosulfan in 02/2013. Before transplant HIV resistance analysis was performed for PR, RT, IN and viral tropism was determined.

• There were no significant resistance mutations and the

coreceptor-usage was predicted as R5-tropic (Sanger sequencing: FPR 44.5%; NGS: 0.14% X4 at 3.5% FPR; geno2pheno). The proviral DNA load was 29400 cop/mL and in the western blot all anticipated bands could be detected. During transplant and until today the patient remained on ART (since 06/2014 ABC/3TC/DTG) and the viral load remained undetectable in plasma and liquor. He had a 2nd relapse of AML in 06/2013 but re-entered molecular remission after a total of 8 courses of 5-azacytidine and 4 donor lymphocyte

• infusions. Concerning HIV, all collected samples were negative

for proviral DNA by conventional and digital droplet PCR* in two different labs, namely PBMCs (06/2014, 01/2015* and 02/2015), rectal biopsy (04/2015) and bone marrow (08/2015*). Western blots from 06/2014 and 02/2015 showed incomplete patterns with fading bands.

• Like in the Berlin patient, all tests from the Duesseldorf patient

so far suggest that HIV may have been eradicated and that he may be the second individual cured from HIV by allogeneic CCR5-d32 HSCT. Further investigations will be performed before considering the discontinuation of ART.

#364 G. Kobbe et al. CROI 2016 Boston MA USA

26 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

27 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten

28 T-Zell-Lymphom bei einem HIV-Patienten