Introduc)on to Molecular Biology 02-223 How to Analyze Your - PowerPoint PPT Presentation

Introduc)on ¡to ¡Molecular ¡Biology ¡ 02-­‑223 ¡How ¡to ¡Analyze ¡Your ¡Own ¡Genome ¡ Fall ¡2013 ¡

Overview ¡ • Primer ¡on ¡molecular ¡cell ¡biology ¡ – The ¡basic ¡mechanisms ¡of ¡the ¡expression ¡of ¡geneDc ¡informaDon ¡ • DNA, ¡RNA, ¡protein ¡ • TranscripDon ¡and ¡translaDon ¡

DNA ¡ • Double-­‑stranded ¡ helix ¡made ¡up ¡of ¡ the ¡nucleoDdes ¡A, ¡ C, ¡G, ¡and ¡T ¡ • Sugar ¡in ¡its ¡ nucleoDdes ¡is ¡ deoxyribose ¡ • NucleoDdes ¡form ¡ A–T ¡and ¡G–C ¡base ¡ pairs ¡across ¡the ¡ helix ¡

Central ¡Dogma: ¡How ¡the ¡Informa)on ¡in ¡DNA ¡is ¡ Expressed ¡ Gene ¡ DNA ¡ (Sequence ¡of ¡ A, ¡T, ¡C, ¡G’s ) ¡ TranscripDon ¡ (Sequence ¡of ¡A, ¡U, ¡C, ¡ G’s) ¡ TranslaDon ¡ Protein ¡ (Sequence ¡of ¡amino ¡ acids ) ¡ Nearly ¡universal ¡ across ¡all ¡species! ¡

Genes ¡ • In ¡the ¡recent ¡human ¡Encyclopedia ¡of ¡DNA ¡elements ¡(ENCODE) ¡ project ¡ – ~20,000 ¡protein-­‑coding ¡genes ¡were ¡studies, ¡which ¡covers ¡2.94% ¡of ¡the ¡ genome ¡ – Non-­‑protein ¡coding ¡regions ¡of ¡the ¡genome? ¡ • >80% ¡of ¡the ¡genome ¡is ¡funcDonal ¡as ¡regulatory ¡sequences, ¡based ¡ on ¡the ¡analysis ¡of ¡ENCODE ¡data ¡ h_p://www.nature.com/encode/#/threads ¡

RNA ¡ • RNA ¡is ¡similar ¡to ¡DNA, ¡except ¡that: ¡ – it ¡is ¡usually ¡single-­‑stranded ¡ ¡ – Sequence ¡of ¡A, ¡U, ¡C, ¡G ¡ • it ¡has ¡U ¡in ¡place ¡of ¡T, ¡compared ¡to ¡DNA ¡ – the ¡sugar ¡in ¡RNA ¡nucleoDdes ¡is ¡ribose ¡instead ¡of ¡deoxyribose ¡ – Protein-­‑coding ¡RNA: ¡mRNA ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡Non-­‑protein-­‑coding ¡RNA ¡

Transcrip)on ¡ ¡ TranscripDon ¡begins ¡with ¡ • binding ¡ by ¡RNA ¡ polymerase ¡at ¡a ¡ promoter ¡ region ¡of ¡DNA . ¡ The ¡ σ ¡subunit ¡ is ¡ • responsible ¡for ¡promoter ¡ recogniDon ¡(in ¡bacteria). ¡ Once ¡iniDaDon ¡has ¡been ¡ • completed ¡with ¡the ¡ synthesis ¡of ¡the ¡first ¡8–9 ¡ nucleoDdes, ¡sigma ¡( σ ) ¡ dissociates ¡and ¡elongaDon ¡ proceeds ¡with ¡the ¡core ¡ enzyme. ¡

Prokaryote ¡vs ¡Eukaryote ¡Genomes ¡ • EukaryoDc ¡mRNAs ¡require ¡processing ¡to ¡produce ¡mature ¡ mRNAs. ¡ – Introns ¡( intervening ¡sequences ) ¡are ¡regions ¡of ¡the ¡iniDal ¡RNA ¡transcript ¡ that ¡are ¡not ¡expressed ¡in ¡the ¡amino ¡acid ¡sequence ¡of ¡the ¡protein. ¡ – Introns ¡are ¡removed ¡by ¡splicing ¡and ¡the ¡ exons ¡ ( expressed ) ¡are ¡joined ¡ together ¡in ¡the ¡mature ¡mRNA. ¡ ¡ • The ¡size ¡of ¡the ¡mature ¡mRNA ¡is ¡usually ¡much ¡smaller ¡than ¡ that ¡of ¡the ¡iniDal ¡RNA. ¡ • Prokaryote ¡genomes ¡do ¡not ¡have ¡introns ¡

Splicing ¡out ¡the ¡Introns ¡

Transcrip)on ¡in ¡Eukaryotes: ¡Introns ¡and ¡Exons ¡

Transcrip)on ¡in ¡Eukaryotes: ¡Introns ¡and ¡Exons ¡

Transcription Has Been Visualized by Electron Microscopy ¡

Central ¡Dogma ¡

Central ¡Dogma ¡ RNA ¡derived ¡from ¡complementary ¡ bases ¡in ¡DNA ¡ In ¡mRNA, ¡ triplet ¡codons ¡specify ¡1 ¡amino ¡acid ¡

Gene)c ¡Code ¡for ¡Transla)on ¡ GeneDc ¡code ¡is ¡ • degenerate , ¡with ¡many ¡ amino ¡acids ¡specified ¡by ¡ more ¡than ¡one ¡codon. ¡ Only ¡tryptophan ¡and ¡ • methionine ¡are ¡encoded ¡ by ¡a ¡single ¡codon. ¡ The ¡geneDc ¡code ¡shows ¡ • order ¡in ¡that ¡chemically ¡ similar ¡amino ¡acids ¡oeen ¡ share ¡one ¡or ¡two ¡middle ¡ bases ¡in ¡the ¡triplets ¡ encoding ¡them. ¡

Ini)ator ¡and ¡Termina)on ¡Codons ¡ • Termina)on ¡codons: ¡ UAG, ¡UAA, ¡and ¡UGA ¡do ¡not ¡code ¡for ¡any ¡ amino ¡acid. ¡ • Ini)ator ¡codon : ¡AUG ¡is ¡the ¡only ¡codon ¡to ¡encode ¡for ¡ methionine. ¡

Summary ¡ • Central ¡dogma ¡ – TranscripDon ¡of ¡DNA ¡to ¡mRNA ¡ – TranslaDon ¡of ¡mRNA ¡to ¡proteins ¡ • Introns/Exons ¡in ¡eukaryote ¡genomes ¡