Characterizing Protease Ac1vity and Selec1vity Advisor: - - PowerPoint PPT Presentation

characterizing protease ac1vity and selec1vity
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Characterizing Protease Ac1vity and Selec1vity Advisor: Patrick Daugherty Graduate Mentor: Jennifer Guerrero Department: Chemical Engineering Interns: Anthony Prieto,


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Characterizing ¡Protease ¡Ac1vity ¡ and ¡Selec1vity ¡

Advisor: ¡Patrick ¡Daugherty ¡ Graduate ¡Mentor: ¡Jennifer ¡Guerrero ¡ Department: ¡Chemical ¡Engineering ¡

¡Interns: ¡Anthony ¡Prieto, ¡Brian ¡Novoa, ¡

Charles ¡Yuhas, ¡and ¡Mohammad ¡Ali ¡

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Metastasis ¡is ¡when ¡cancer ¡ spreads ¡from ¡the ¡primary ¡ tumor ¡to ¡secondary ¡

  • loca1ons. ¡

¡ Normal ¡Cells ¡ Primary ¡Tumor ¡

hHp://www.cancerresearchuk.org/ ¡

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Healthy ¡Cells ¡ Protease ¡ Cell ¡Adhesion ¡ ¡ Substrates ¡ Cancer ¡Cells ¡

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SLIDE 4

hK7 ¡ S1-­‑FibronecCn ¡ S2-­‑Desmocollin-­‑1 ¡ S3-­‑Desmoglein-­‑1 ¡ S4-­‑Desmoglein-­‑2 ¡ S5-­‑E-­‑cadherin ¡ Cleavage ¡ Binding ¡ Substrate ¡

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+ ¡ Substrate ¡

Yellow: ¡No ¡Cleavage ¡ Cyan: ¡Cleavage ¡

hK7 ¡ 408 ¡nm ¡ FRET: ¡Forster ¡Resonance ¡Energy ¡Transfer ¡

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Bacteria ¡cell ¡ Yeast ¡Cell ¡ Promoter ¡ Substrate ¡ Promoter ¡ hK7 ¡ Isolated ¡Substrate ¡ Isolated ¡hK7 ¡

hHp://en.wikipedia.org/wiki/KLK7 ¡ hHp://web.uvic.ca/~raad/Research.html ¡ +

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0 ¡ 25 ¡ 50 ¡ 75 ¡ 100 ¡ S1 ¡ S2 ¡ S3 ¡ S4 ¡ S5 ¡ Nega1ve ¡ Control ¡ Percent ¡of ¡Substrate ¡Cut ¡

S1-­‑FibronecCn ¡ S2-­‑Desmocollin-­‑1 ¡ S3-­‑Desmoglein-­‑1 ¡ S4-­‑Desmoglein-­‑2 ¡ S5-­‑E-­‑cadherin ¡

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0 ¡ 25 ¡ 50 ¡ 75 ¡ 100 ¡ S1 ¡ S2 ¡ S3 ¡ S4 ¡ S5 ¡ Nega1ve ¡ Control ¡ Percent ¡of ¡Substrate ¡Cut ¡

S1-­‑FibronecCn ¡ S2-­‑Desmocollin-­‑1 ¡ S3-­‑Desmoglein-­‑1 ¡ S4-­‑Desmoglein-­‑2 ¡ S5-­‑E-­‑cadherin ¡

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Substrate ¡ Permanent ¡Binding ¡ Inhibitor ¡

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0 ¡ 25 ¡ 50 ¡ 75 ¡ 100 ¡ S1 ¡ S2 ¡ S3 ¡ S3 ¡+ ¡ Inhibitor ¡ S4 ¡ S5 ¡ Nega1ve ¡ Control ¡ Percent ¡of ¡Substrate ¡Cut ¡

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Healthy ¡Cells ¡ Protease ¡ Cell ¡Adhesion ¡ ¡ Substrates ¡ Cancer ¡Cells ¡ Substrates ¡S2, ¡Desmocollin-­‑1, ¡and ¡S3, ¡Desmoglein-­‑1, ¡were ¡ ¡ cleaved ¡the ¡fastest ¡by ¡hK7. ¡ ¡

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SLIDE 12

Healthy ¡Cells ¡ Protease ¡ Cell ¡Adhesion ¡ ¡ Substrates ¡ Inhibitor ¡ Cancer ¡Cells ¡

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Advisor: ¡Patrick ¡Daugherty ¡

Graduate ¡Mentor: ¡Jennifer ¡Guerrero ¡ Program ¡Advisors: ¡Maria ¡Napoli, ¡Jens ¡Kuhn, ¡and ¡Chrysafis ¡Andreau ¡ RAs: ¡Sarah ¡Maxel, ¡Kori ¡Lay, ¡Spencer ¡Igram, ¡and ¡Stephanie ¡Mendes ¡ ¡ ¡ ¡