SLIDE 1
Characterizing ¡Protease ¡Ac1vity ¡ and ¡Selec1vity ¡
Advisor: ¡Patrick ¡Daugherty ¡ Graduate ¡Mentor: ¡Jennifer ¡Guerrero ¡ Department: ¡Chemical ¡Engineering ¡
¡Interns: ¡Anthony ¡Prieto, ¡Brian ¡Novoa, ¡
Charles ¡Yuhas, ¡and ¡Mohammad ¡Ali ¡
SLIDE 2 Metastasis ¡is ¡when ¡cancer ¡ spreads ¡from ¡the ¡primary ¡ tumor ¡to ¡secondary ¡
¡ Normal ¡Cells ¡ Primary ¡Tumor ¡
hHp://www.cancerresearchuk.org/ ¡
SLIDE 3
Healthy ¡Cells ¡ Protease ¡ Cell ¡Adhesion ¡ ¡ Substrates ¡ Cancer ¡Cells ¡
SLIDE 4
hK7 ¡ S1-‑FibronecCn ¡ S2-‑Desmocollin-‑1 ¡ S3-‑Desmoglein-‑1 ¡ S4-‑Desmoglein-‑2 ¡ S5-‑E-‑cadherin ¡ Cleavage ¡ Binding ¡ Substrate ¡
SLIDE 5
+ ¡ Substrate ¡
Yellow: ¡No ¡Cleavage ¡ Cyan: ¡Cleavage ¡
hK7 ¡ 408 ¡nm ¡ FRET: ¡Forster ¡Resonance ¡Energy ¡Transfer ¡
SLIDE 6 Bacteria ¡cell ¡ Yeast ¡Cell ¡ Promoter ¡ Substrate ¡ Promoter ¡ hK7 ¡ Isolated ¡Substrate ¡ Isolated ¡hK7 ¡
hHp://en.wikipedia.org/wiki/KLK7 ¡ hHp://web.uvic.ca/~raad/Research.html ¡ +
SLIDE 7 0 ¡ 25 ¡ 50 ¡ 75 ¡ 100 ¡ S1 ¡ S2 ¡ S3 ¡ S4 ¡ S5 ¡ Nega1ve ¡ Control ¡ Percent ¡of ¡Substrate ¡Cut ¡
S1-‑FibronecCn ¡ S2-‑Desmocollin-‑1 ¡ S3-‑Desmoglein-‑1 ¡ S4-‑Desmoglein-‑2 ¡ S5-‑E-‑cadherin ¡
SLIDE 8 0 ¡ 25 ¡ 50 ¡ 75 ¡ 100 ¡ S1 ¡ S2 ¡ S3 ¡ S4 ¡ S5 ¡ Nega1ve ¡ Control ¡ Percent ¡of ¡Substrate ¡Cut ¡
S1-‑FibronecCn ¡ S2-‑Desmocollin-‑1 ¡ S3-‑Desmoglein-‑1 ¡ S4-‑Desmoglein-‑2 ¡ S5-‑E-‑cadherin ¡
SLIDE 9
Substrate ¡ Permanent ¡Binding ¡ Inhibitor ¡
SLIDE 10
0 ¡ 25 ¡ 50 ¡ 75 ¡ 100 ¡ S1 ¡ S2 ¡ S3 ¡ S3 ¡+ ¡ Inhibitor ¡ S4 ¡ S5 ¡ Nega1ve ¡ Control ¡ Percent ¡of ¡Substrate ¡Cut ¡
SLIDE 11
Healthy ¡Cells ¡ Protease ¡ Cell ¡Adhesion ¡ ¡ Substrates ¡ Cancer ¡Cells ¡ Substrates ¡S2, ¡Desmocollin-‑1, ¡and ¡S3, ¡Desmoglein-‑1, ¡were ¡ ¡ cleaved ¡the ¡fastest ¡by ¡hK7. ¡ ¡
SLIDE 12
Healthy ¡Cells ¡ Protease ¡ Cell ¡Adhesion ¡ ¡ Substrates ¡ Inhibitor ¡ Cancer ¡Cells ¡
SLIDE 13
Advisor: ¡Patrick ¡Daugherty ¡
Graduate ¡Mentor: ¡Jennifer ¡Guerrero ¡ Program ¡Advisors: ¡Maria ¡Napoli, ¡Jens ¡Kuhn, ¡and ¡Chrysafis ¡Andreau ¡ RAs: ¡Sarah ¡Maxel, ¡Kori ¡Lay, ¡Spencer ¡Igram, ¡and ¡Stephanie ¡Mendes ¡ ¡ ¡ ¡